Efeitos dos agrotóxicos sobre as abelhas silvestres no Brasil
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Extração das amostras adsorvidas na fase só-
lida:
1.
Macerar uma alíquota de 3 g de abelhas lio-
filizadas; adicionar 20 g de terra diatomácea.
1.
Colocar a mistura resultante em uma coluna
para a extração de compostos lipofílicos.
2.
Aguardar 10 minutos, eluir com 100 ml de
Diclorometano - a extração estará completa
após 20 min.
3.
Recuperar cerca de 70 ml do extrato, secar
em evaporador rotativo à pressão reduzida e
a uma temperatura abaixo de 40 °C.
4.
Coletar o resíduo com 1 ml de Acetato de Etila
Cicloexano.
Cromatografia por permeação em gel:
1. Preencher uma coluna de vidro para GPC (45
× 1 cm) com resina 200-400 mesh SX Biobea-
ds. Para o gel de resina, deve ser adicionado
Acetato de Etila Cicloexano na proporção de
1:1, essa mistura constituirá a fase móvel.
2. A partir daí, injetar 1 ml da amostra em uma
coluna e coletar a fração intermediária (15
ml) do fracionado. O fluxo de fase Hexano-
Acetato de Etila (1:1) deve ser regulado em
1 ml / min.
3. Para diminuir o volume da amostra contendo
os pesticidas, colocá-la em um evaporador
rotativo à pressão reduzida e temperatura
abaixo de 40 °C.
4. Coletar o resíduo com 2 ml de Acetona, para
fins de análise por cromatografia gasosa.
Cromatografia gasosa:
1.
No estudo apresentado foi utilizado um cro-
matógrafo equipado com um sistema detec-
tor de Nitrogênio Fósforo (NPD) (290 °C) e AS
800 mostrador automático para analisar os
pesticidas em amostras de abelhas. O ins-
trumento tinha um capilar de Sílica fundida,
coluna SPB-608 ™ 30 m, 53 mM ID, 0,50 es-
pessura de filme.
2. O Hélio foi usado como gás de transporte,
com uma velocidade de fluxo de 15 ml/min.
3. A amostra foi injetada usando o método spli-
tless. As temperaturas foram programadas
da seguinte forma: a injeção de 60 °C, au-
mentando para 120 °C, com aumentos de 50
°C/min; 120-250 °C, com aumentos de 10 °C/
min seguido por condições isotérmicas por
20 min.
4. Dissolver o extrato obtido em até 2 ml de
acetona e injetar 1 µl no cromatógrafo a gás,
por meio do amostrador automático.
5. O sinal de cromatografia em fase gasosa foi
processado pelo software de operação do
instrumento (Borwin 6.11, Jasco, Japan).
Essas ferramentas permitem visualizar o es-
tado de conservação do ambiente que está sendo
monitorado, possibilitando o acesso a possíveis dis-
túrbios causados pela intoxicação por agrotóxicos.
6.3.7 Sétima etapa – análise dos dados
Para as análises referentes ao desenvolvimen-
to da colônia, serão calculadas a média e o desvio
padrão do número de discos de cria, de células em
construção, potes de alimento contendo mel e pó-
len e potes de alimento em construção. Deverá ser
criado um gráfico comparativo do comportamento
dessas variáveis ao longo do tempo de observação.
No eixo X deverão ser plotados os dias de observa-
ção e no eixo Y as médias dos valores encontrados
para as três colmeias em cada uma das faixas. Ou-
tra comparação interessante é entre a contaminação
presente em cada uma das faixas estabelecidas e os
dados referentes à saúde da colmeia.
Essas representações gráficas ilustrarão, de
forma didática, como as colônias se desenvolveram
nas condições às quais foram expostas. Em condi-
ções de campo, onde não há controle das variáveis
ambientais, outros fatores podem causar mudanças
na saúde da colônia. Podemos apenas sugerir que
a situação a ser descrita seja consequência da pre-
sença de resíduos de agrotóxicos. Para obter essa
confirmação é importante que testes realizados em
laboratório identifiquem e quantifiquem os efeitos su-
bletais dos agrotóxicos aplicados nas espécies usa-
das neste livro, para, a partir daí, inferirmos com mais
acurácia que tais sequelas são consequências dos
efeitos subletais gerados.
Para as análises estatísticas, será aplicado
o teste de Regressão, e o
α
adotado será de 0,05.
Para tanto, serão utilizados os dados encontrados
