Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis
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150 °C, 3 °C/min, 200 °C, 8 °C/min, 290 °C
(8 min), temperatura do detector 300 °C, tem-
peratura do injetor 250 °C, operado no modo
splitless e volume de injeção de 1 µL;
* a espectrometria de massa seguirá os se-
guintes parâmetros: impacto de elétrons a
70 eV, temperatura da fonte 250 °C, linha de
transferência 290 °C, eletromultiplicador a
1.200 V, velocidade de varredura 1,5 scan/s,
no intervalo de massa 40-600 m/z.
b)
Pólen
* A busca por resíduos de contaminantes nas
amostras de pólen deve ser feita por meio da
cromatografia líquida com espectrometria de
massa (CHAUZAT et al., 2006). Para a análise
do pólen, a extração deve ser feita através de
QuEChERS, seguindo o protocolo estabeleci-
do por Mullin et al.(2010); em sua pesquisa foi
utilizado o combo de cera + pólen.
* cerca de 3 g do material deve ser pesada em
um tubo plástico de centrífuga de 50 ml, onde
serão acrescentados 100µl de solução de
PCS (process control spiking);
* depois, adicionar 27 ml de solução de extra-
ção (44% água deionizada, 55% Acetonitrila,
e 1% de Ácido Acético Glacial), Colocar 100
µl da solução de ISTD (internal standard spi-
king);
* a amostra de cera deve ser aquecida a 80 °C
por 20 minutos em banho-maria, seguido de
resfriamento à temperatura ambiente;
* adicionar 6 g do sulfato de Magnésio Anidro
(MgSO4) e 1,5 g de Acetato de Sódio Anidro
(NaAc) para cada amostra;
* os tubos devem ser selados e agitados vigo-
rosamente durante um minuto, centrifugados,
e 1 ml do sobrenadante A ou seu concentra-
do transferido para um
epnddorf
de 2 ml con-
tendo 0,05 g de Amina primária secundária
(PSA), 0,05 g de C18 e 0,15 g MgSO4;
* após usar o vórtex por 1 minuto para homo-
geinização, essa solução será centrifugada
e o sobrenadante transferido para um fras-
co amostrador automático para análise por
LC/MS-MS, usando uma coluna de 3,5 µm,
2.16150 mm Agilent Zorbax SB-C18 e um
Agilent LC 1100 com uma bomba binária co-
nectada a um Thermo-Fisher TSQ Quantum
Discovery triple quadrupole MS.
Segundo Chen e Wang (1996), amostras de
tecido animal que possuem elevado teor de lipídios
são homogeneizadas com uma mistura binária de
Acetona-Hexano ou Dietil Éter na presença de Sul-
fato de Sódio Anidro, proporcionando a extração de
grande variedade de compostos lipofílicos.
c)
Abelhas
As técnicas de análise de resíduos de agrotóxi-
co no corpo das abelhas ainda geram grandes con-
trovérsias. Uma técnica que demonstrou eficiência
foi a cromatografia gasosa (PINTO; MIGUEL, 2008),
mas a metodologia para a extração da substância de
interesse ainda não foi estabelecida. Atualmente, a
extração em fase sólida (SPE) é uma das melhores e
mais empregadas ferramentas para a extração e/ou
pré-concentração de analitos presentes em matrizes
complexas (SANTOS, et al., 2008).
O maior problema é a escassez de artigos
acerca de metodologias para esse fim. No Brasil, o
único grupo de pesquisa encontrado que desenvol-
veu um método multirresíduo para essa finalidade,
foi o do Professor Renato Zanella, do Laboratório
de Análises de Resíduos de Pesticidas (LARP) da
UFSM (Santa Maria-RS). Mas, por seu artigo ainda
não ter sido publicado, não podem ser divulgadas as
informações. Esse método tem sido utilizado para a
prestação de serviço (análises) por algumas firmas
interessadas. Ele chegou a informar que na literatura
não há trabalhos desse tipo com abelhas.
Essa dificuldade decorre da complexidade da
matriz formada pelo corpo da abelha, que requer a
purificação prévia da amostra. Os métodos existen-
tes, em geral, exigem muita destreza e consomem
bastante solvente (ROSSI et al., 2001). Entretanto, foi
possível encontrar um método multirresíduo de aná-
lise por cromatografia gasosa de pesticidas em abe-
lhas purificadas por cromatografia de permeação
em gel (GPC). De acordo com Rossi et al.(2001), a
metodologia é a seguinte:
Amostras
1. As amostras devem ser liofilizadas a -20
o
C, a
fim de evitar a putrefação e facilitar a análise.
