Produção de Shiitake
em
toras de
eucalipto
47
· Procedimento
6.
Esperar
que
a
temperatura
e
a
1.
Seguindo
as
instruções da
emba-
lagem
para o preparo do meio de
cultivo BDA,
deve-se pesar
a
quan-
tidade de pó necessário para o pre-
paro de
1 L de meio de
cultivo;
2.
Medir o volume
de
água
destilada
em uma proveta
e
transferi-la
com
o pó
para um Erlenmeyer;
3.
Dissolver
o
pó
agitando
manual-
mente
com
um bastão de vidro ou
colocar
uma barra magnética den-
tro do Erlenmeyer
e
levar
ao
agi-
tador
magnético
até
obter
uma
suspensão
homogênea;
4.
Fechar o Erlenmeyer
com
tampão
de
algodão
e
papel de
alumínio;
5.
Colocar
o Erlenmeyer
contendo o
meio de
cultivo para
esterilizar na
autoclave
(121
O
C,
1
atm
durante
20 minutos)
(Figura 41);
pressão dentro da
autoclave
dimi-
nuam para
retirar
o Erlenmeyer;
7.
Deixar
esfriar
o meio de
cultivo
até
atingir
uma
temperatura que per-
mita
o
seu
manuseio
(45
O
C
a
55
O
C). Em
temperaturas
inferiores
a
estas o meio
torna-se
sólido
im-
possibilitando
a
colocação
nas
placas de Petri;
8.
Desembrulhar
as
placas
de
Petri
esterilizadas
e
identificar
com
o
nome
do meio de
cultivo
e
a data
da
sua
elaboração;
9.
Verter
o
meio
de
cultivo
nas
pla-
cas
de
Petri
(9
cm
de
diâmetro)
(Figura
42)
em
condições
de
assepsia,
fazendo
uma
camada
de
aproximadamente
5 mm
(com
20
a 25 mL por placa);
Figura 41. Autoclave
para
esterilização
do material
Figura 42. Placas
de Petri
para produção
do
inóculo
10. Deixar
solidificar
o meio de
cultivo
e
utilizar
imediatamente,
ou
então,
in-
verter
a
placa
contendo o meio de
cultivo
sólido
e
armazenar
a 4
o
C
(ge-
ladeira)
até
a
sua utilização. É
reco-
mendável
passar
filme plástico
(de
‘semente’
